Метод радиационной инактивации для определения размера мишени все чаще применяется при исследовании мембранных белков. Изучать можно как очищенные белки, так и неочищенные препараты, в том числе интактные биомембраны. Суть метода состоит в определении доли белковых молекул, получающих повреждения при облучении. Для этого используют ферментативные методы связывания гормонов или других лигандов или спектральные методы. Процедура состоит в следующем. Образец, обычно замороженный, подвергают высокоэнергетическому облучению (например, облучают пучком электронов из синхротрона). Через разные промежутки времени отбирают пробы, размораживают их и проводят измерения. Повреждения белка под действием излучения (в частности, разрыв ковалентных связей) выявляют, например, с помощью электрофореза в ПААГ с ДСН. Как показывает опыт, некоторые субъединицы полностью утрачивают биологическую активность при внесении радиационного повреждения в любое место полипептидной цепи. Ключевым моментом является то, что, чем крупнее белковая молекула, тем больше вероятность ее повреждения и, следовательно вероятность инактивации. Эта вероятность зависит не от формы молекулы, а от ее массы. Обычно для того, чтобы облегчить интерпретацию результатов, параллельно облучают белок с известной молекулярной массой. Если исследуемый белок содержит более одной субъединицы, возникают определенные трудности при анализе результатов.

Похожие материалы:

Тип Бесчерепные. Ланцетники.
Строение тела у ланцетников очень простое. Если сравнивать их с другими животными, относящимися к типу хордовых, то в организме ланцетника многого можно «недосчитаться». Например, нет черепа (не случайно их выделили в тип бесчерепных), а ...

Перемещение и обитаемая территория
В понятие «перемещения животных» вкладывается широкий смысл. Под ними понимают периодические миграции, спорадические выселения, приводящие к пульсации (или расширению) ареала, суточные или сезонные передвижения в пределах индивидуального ...

Раскрыть, что признается «охотой» и что к ней приравнивается
Охотой признаются выслеживание с целью добычи, преследование и сама добыча диких зверей и птиц. Нахождение в угодьях, вне дорог общего пользования, с орудиями добычи (ружье, капканы и др.) или с добытой дичью приравнивается к охоте. Нахо ...